常见问题解答 • MatTek 生命科学

来自 : 发布时间：2024-05-14

常见问题玻璃底培养皿Q1：玻璃底培养皿通常如何使用？MatTek 的玻璃底培养皿有无涂层或涂有聚-d-赖氨酸或胶原蛋白的可供选择。所有培养皿都经过伽马射线照射，以确保无菌。

其使用的一般程序如下。

保持无菌：在无菌环境（例如层流罩）中打开培养皿。预平衡培养皿：用培养基孵育培养皿。将 2-3 ml 培养基移入 35 mm 培养皿中，或将 3-4 ml 培养基移入 50 mm 培养皿中，并在 37° C 下孵育 15 分钟。将细胞悬浮液添加到微孔中：通过抽吸除去培养基，并将细胞铺在玻璃表面上。将 250 µl 细胞悬液（悬浮在培养基中的细胞）移入 10 mm 直径的微孔中，将 500 µl 细胞悬液移入 14 mm 微孔中，或将 1 ml 细胞悬液移入 20 mm 孔中。将培养皿在 37° C 下孵育 1 小时。添加额外的培养基：1 小时后，轻轻地将培养皿的剩余部分填满h 中等。在 35 毫米培养皿中添加 2-3 毫升，在 50 毫米培养皿中添加 3-4 毫升。

注意：在最初一小时让细胞附着到玻璃表面后，重要的是要将培养皿填充到正常水平，以尽量减少蒸发的影响并避免引起渗透压变化。问题 2：我应该使用哪种类型的玻璃底培养皿来培养细胞？很难预测哪种类型的玻璃底培养皿最适合您的特定细胞类型。无涂层（例如部件号 P35G- 或 P50G-）或高粘附力（例如部件号：P35G-…..-HA）培养皿非常适合许多转化或癌细胞系。聚-d-赖氨酸包被的培养皿（部件#P35GC-…）适用于神经元培养和许多原代细胞；其他细胞更喜欢胶原蛋白涂层（部分#P35GCol-...）。此外，许多研究人员购买我们的无涂层培养皿并涂上他们自己的专用涂层。使用 MatTek 玻璃底培养皿和细胞在线搜索已发表的方法可能有助于确定最佳方法选择（有关如何使用 MatTek 玻璃底培养皿搜索已发表方法的常见问题解答 #3 以及我们网站上的参考资料。

注意：对于几乎所有显微镜应用，首选 1.5 号盖玻片厚度（例如部件号：P35G-1.5-... 或 P50G-1.5-...）。问题 3：如何使用 MatTek 玻璃底培养皿搜索已发表的方法？我们收集并编录了数百篇引用 MatTek 玻璃底培养皿使用的技术论文培养皿。您可以在我们的网站上搜索我们的编目出版物数据库。注意：如果文献文章中未指定确切的玻璃底培养皿部件号，则可以安全地假设使用了未涂覆的培养皿（例如部件号：P35G-1.5-14-C、P50G-1.5-30-F 等）。问题 4：如果我想促进生长或者我的细胞无法在玻璃底培养皿上生长，我该怎么办？以增加细胞附着和扩散，我们推荐高粘附培养皿（例如部件号 P35G-1.5-14-C-HA）。

对于某些细胞，最佳附着和扩散ding 将需要细胞外基质涂层。我们的聚-d-赖氨酸或胶原蛋白涂层适用于绝大多数细胞，但是，一些客户发现有必要使用他们自己的专用涂层来涂覆玻璃底培养皿。这些客户购买高附着力（例如零件号：P35G-…..-HA）盘，并使用该程序以及他们选择的涂层。1。用磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 冲洗培养皿，并用超纯 H2O 冲洗 1 倍；2。将选择的涂层涂在餐具上。在许多情况下，让涂层溶液在 37°C 下与玻璃保持接触 18-24 小时而不让培养皿变干是有益的。对于神经元细胞，应用 0.5 mg/mL 的聚-d-赖氨酸过夜，并且不要让培养皿干燥 3. 包被完成后，添加相似体积的培养基，您将在其中铺板细胞以预平衡玻璃表面。将培养基在玻璃底培养皿中于 37°C 下孵育 15 分钟。取出培养基，然后板

要尝试无涂层玻璃底培养皿的样品，请在此处索取免费样品盒。问题 5：无涂层玻璃底培养皿和高粘附力 (-HA) 玻璃底培养皿之间有什么区别？HA 培养皿使用经过专门清洁和优化的玻璃盖玻片，可用于细胞附着和铺展。高粘附培养皿（例如 P35G-1.5-14-C-HA）没有涂有细胞外基质，但许多研究人员发现 -HA 培养皿可以使细胞更好、更一致地附着和生长。问题 6：可以将盖玻片从玻璃底培养皿上取下吗？可以，但对于大多数应用，可以使用各种倒置和正置显微镜在不除去盖玻片的情况下观察玻璃底培养皿中生长的细胞。

如果有必要（例如长期使用）保存目的），可以使用以下程序移除盖玻片：

订购零件 #PDCF OS 30（用于从玻璃底培养皿中移除盖玻片的液体）翻转培养皿的盖子。将 1.0 ml 液体移入将培养皿底部放在盖子上。确保倒置盖中的液体接触盖玻片底部。让培养皿在室温下在液体中静置 45 分钟。用吸水纸巾擦干盖玻片底部。将培养皿放在干净的表面上。使用镊子向下按压盖玻片的内边缘，将盖玻片与培养皿分离。

注意：如果遵循上述步骤，PDCF OS 30 液体将不会接触细胞，也不会破坏盖玻片上的细胞或其染色。盖玻片可以在不损坏的情况下取下。问题 7：如何控制原位（活体）显微镜玻璃底培养皿的温度？

为了近似生理条件，可以使用显微镜载物台加热器和适当的载物台适配器来控制玻璃底培养皿中所含介质的温度。

与 P35G 培养皿（康宁 35 毫米培养皿）一起使用：培养皿加热器（部件号：DH-35）、显微镜载物台适配器（部件号：SA 显微镜型）、加热器控制器（部件号：TC324-B）和连接器电缆（部件号：CC-28）可从 Warner Instrument Corporation 购买。信息可在线获取：https://www.warneronline.com/Q8：为什么要使用包含网格盖玻片的玻璃底培养皿？网格的大小是多少？如果我看不到网格怎么办？

网格化盖玻片允许人们引用特定的细胞并随着时间的推移跟踪它们。例如，可以对单个细胞进行显微注射，返回培养箱，并在多个时间点进行观察，因为每个细胞都可以用培养皿中唯一的字母数字坐标进行识别。提供含有网格 Bellco 玻璃盖玻片的玻璃底培养皿。标准网格培养皿指定为第 # 部分：P35G-1.5-14-C-GRD 和 P50G-1.5-14-FGRD。

网格大小：第 # 部分的 P35G-1.5-14-C-GRD 和 P50G-1.5-14-FGRD 上的网格由 520 个独特的字母数字方块组成。每个方块的尺寸600 微米 x 600 微米。线条厚度为 20 微米。

网格可视化：使用 10 倍明场物镜应该可以轻松观察网格。找到感兴趣的细胞后，您可以切换到更高的放大倍率或荧光物镜。但是，使用更高功率或荧光物镜将无法观察到网格。

我看不到网格：汇合的单层细胞通常会遮盖网格，从而使其变得困难或不可能想象一下。如果你的c如果细胞汇合，您可以使用零件号 P35G-1.5-14-CGR​​D-D，将网格放置在培养皿的外部，不受盖玻片上生长的细胞的影响。要使用此培养皿，请找到感兴趣的细胞，然后聚焦到盖玻片的底部以获得其坐标。

相关光和电子显微镜 (CLEM)：P35G-1.5-14-C-GRD 玻璃底培养皿与 CLEM 配合良好；但是，不建议将 P35G-1.5-14-CGR​​D-D 用于 CLEM，因为细胞和网格处于不同的焦平面。 Q9：如何使用玻璃底培养皿观察组织切片？玻璃底培养皿也可用于对组织切片成像。使用 Corning Cell-Tak 将切片粘附到培养皿上。一篇利用 MatTek 玻璃底培养皿对脑切片进行共焦显微镜检查的研究论文已经发布。问题 10：玻璃底培养皿可以重复使用吗？我们不建议重复使用玻璃底培养皿。基材的表面特性培养的细胞对细胞的结构和功能具有深远的影响。重复使用餐具会在实验中引入不受控制的变量，这可能会影响所研究的现象。 MatTek 玻璃底培养皿适用于一次性实验。问题 11：MatTek 网站上的\"玻璃底培养皿”产品线信息在哪里？MatTek 的玻璃底培养皿是标准尺寸的 35 和 50 毫米一次性塑料培养皿，带有玻璃盖玻片底部，为研究人员提供体外培养物的超高分辨率显微图像。这些培养皿通常用于共焦、偏振光和荧光成像技术。这些培养皿也是活细胞显微镜检查的理想选择。

MatTek 最近在其玻璃底培养皿产品中添加了玻璃底多孔板。

我们的培养皿有许多不同的名称，包括玻璃底培养皿、玻璃底培养皿、玻璃底培养皿、玻璃底微孔培养皿es，玻璃底无菌培养皿、成像皿和盖玻片底皿。不管它们被称为什么，我们的 35 毫米和 50 毫米玻璃底培养皿以及现在的玻璃底多孔板已成为体外细胞培养物高分辨率显微成像的事实上的标准。

MatTek 玻璃底培养皿和多孔板部件号包括：P35G-0-10-C、P35GC-0-10-C、P35G-0-14-C、P35GC-0-14 -C、P35G-0-20-C、P35GC-1.0-14-C、P35G-1.0-14-C、P35GC-1.5-10-C、P35G-1.5-10-C、P35GC-1.5-14-C、P35G-1.5-14-C、P35GCOL-0-14-C、P35G-1.5-20 -C、P35GCOL-1.0-14-C、P35G-1.5-14-CGR​​D、P35GCOL-1.5-14-C、P50G-0-14-F、P50GC-0-14-F、P50G-1.5-14-F、P50GC-1.5-14-F、P50G-2-14-FGRD、P06G-0-20 -F、P12G-0-14-F、P06G-1.0-20-F、P12G-1.0-14-F、P06G-1.5-20-F、P12G-1.5-14-F、P24G-0-13-F、P96G-1.5-5-F、P24G-1.0-13-F、P24G-1.5-13-F ，P96GC-1.5-5-F。

还提供带有网格玻璃盖玻片的玻璃底皿。部件号包括 P35G-1.5-14-CGR​​D、P50G-1.5-14-FGRD。

MatTek 细胞培养盖玻片套件

MatTek 细胞培养盖玻片套件可立即使用 - 盖玻片置于 35 毫米培养皿中并预先灭菌。标准玻璃盖玻片套件有 CSGK/F、CSGK/C 和 CSGK/N 盖玻片套件配置。这些套件，特别是 CSGK/F，广泛用于羊膜穿刺术测试。

显微镜类型和技术问题 12：玻璃底培养皿适合共聚焦和荧光显微镜吗？是的。玻璃底培养皿非常适合共焦和荧光显微镜。重要的玻璃特性是：

波长超过 320 nm 的入射紫外线不会产生荧光。334 和 365 nm 的汞线不会产生自发荧光。 （注：对于汞照明，滤除波长短于 313 nm 的汞谱线，以获得最佳结果。）折射率 (@ 20°C)：ne 1.5255+/- 0.0015，nD 1.5230，ve 55 阿贝数 V = 55。 Q13：如何使用玻璃底皿对于 Nomarski 微分干涉 (DIC) 显微镜？您需要订购玻璃底皿和玻璃盖。订购任何 P35G 培养皿（例如部件号：P35G-1.5-14-C 或 P35G-1.5-20-C）以及玻璃盖（部件号：P35GTOP-0-20-C）。玻璃底部和玻璃盖都是必需的，以便整个光路仅穿过高光学质量玻璃。玻璃盖可在重新消毒后重复使用，只需将其浸泡在 70% 乙醇中 30 分钟即可。盖子不能高压灭菌。问题 14：培养皿可以用于高分辨率技术，如 GSDIM、dSTORM、PALM 或 TIRF 显微镜吗？可以。对于 GSDIM、dSTORM、PALM、TIRF 等高分辨率技术以及任何数值孔径 > 0.7 的物镜，严格控制盖玻片厚度至关重要。因此，需要使用零件编号为 P35G-0.170-14-C 的培养皿，该培养皿采用高容差 1.5 号盖玻片 (0.170 ± 0.005 mm)。问题 15：为什么 50 mm 玻璃底培养皿可用于显微注射50 毫米玻璃底培养皿（部件号以 P50G- 开头）可用于： 显微注射：较大的直径 (50 毫米) 和较低的侧壁 (9 毫米) 允许在显微注射实验中更容易接触细胞。气氛维持：50 毫米培养皿有一个盖子，可卡在培养皿底部，从而防止培养皿离开培养箱时 5% CO2 气氛的损失。这对于需要长时间观察培养皿的实验非常重要。问题 16：如何灌注在玻璃底培养皿中生长的细胞？Automate Scientific 和 Warner Instruments, Inc. 制造的灌注适配器与 MatTek 的 35 毫米系列玻璃底培养皿（部件编号：P35G-xx-xx-C）兼容。

培养皿属性问题 17：我应该使用什么厚度的盖玻片？各种盖玻片编号对应什么？几乎所有物镜都针对 1.5 号盖玻片厚度进行了优化。使用1.5号测厚仪这对于更高数值孔径的盖玻片 (NA > 0.7) 越来越重要。使用其他厚度的盖玻片可能会导致光学畸变和分辨率损失。因此，对于绝大多数显微镜应用，1.5 号盖玻片厚度是最佳的（例如玻璃底皿部件号：P35G-1.5-xx-C、P50G-1.5-xx-F、P60G-1.5-xx-F 等）。

对于超高分辨率显微镜技术，我们提供高容差的 1.5 号盖玻片，在部件号中指定为 -0.170（例如玻璃底皿部件编号：P35G-0.170-14-C）。

玻璃盖玻片的实际厚度取决于盖玻片编号/部件编号，如下：盖玻片编号/部件#厚度（毫米）00.085-0.131.00.13-0.161.50.16-0.192.00.19-0.230.170*0.16 5-0.175

*指的是玻璃底皿中的 MatTek 名称，部件编号：P35G-0.170-14-C。问题 18：将盖玻片固定到培养皿上所用的粘合剂是什么？虽然粘合剂的具体身份是专有的，但所用粘合剂是无毒硅胶锥体已被证明与多种细胞相容，包括原代神经元和许多其他难以培养的挑剔细胞。问题 19：培养皿可以保存多长时间？涂层玻璃底培养皿可以在室温下黑暗中保存长达 1 年。无涂层培养皿可保存长达 5 年，细胞生长特性不会下降。问题 20：玻璃底培养皿可以在什么温度范围内使用？玻璃底培养皿可以在 -20°C 至 +45°C 的温度范围内使用。在 55°C (131°F) 及以上温度下，餐具会变形。玻璃底培养皿不能进行高压灭菌。问题 21：玻璃底培养皿中使用的玻璃有哪些特性？

MatTek 在其玻璃底培养皿中使用最高品质的硼硅酸盐德国玻璃盖玻片。盖玻片特性如下：

最高的耐水解性（水解等级 1）。优异的耐化学品性。碱释放量约为 15 至 24 µg NA2O/g 玻璃。优异的保护性能荧光显微镜操作。波长超过 320 nm 的入射紫外线不会产生荧光。334 和 365 nm 的汞线不会产生自发荧光。 （注：对于汞照明，滤除波长短于 313 nm 的汞谱线，以获得最佳结果。）折射率 (@ 20°C)：ne= 1.5255+/- 0.0015, nd= 1.5230阿贝数 Ve = 55。Q22：玻璃底皿的微孔有多深？

玻璃底皿中微孔的深度取决于皿的类型和培养皿底部厚度如下：

MatTek 35 mm：0.75-0.85 mmFalcon 50 mm：1.00-1.10 mmFalcon 60 mm：1.15-1.20 mmFalcon 100 mm：0.90-1.00 mm*Falcon 6 孔板：1.45-1.55 mmFalcon 12 孔板：1.4 5-1.55 mmFalcon 24 孔板：1.10-1.20 mmFalcon 96 孔板：1.05-1.25 mmQ23：玻璃底培养皿和多孔板的化学兼容性如何？它们可以与有机溶剂一起使用吗？

玻璃底皿的主体多孔板和多孔板由聚苯乙烯制成。因此，它们与有机溶剂的相容性有限。请参阅化学相容性表。溶剂化学相容性丙酮差氢氧化铵(1N)一般氢氧化铵(25%)一般苯胺好丁醇好氯仿差二甲基甲酰胺差二甲亚砜(DMSO)差DMSO/H2O(20/80)好二恶烷差乙醇好己烷差或盐酸(25%)好盐酸(浓)一般甲醇良好甲基乙基二酮不良二氯甲烷不良硝酸（25%）不良硝酸（浓缩）不良氢氧化钠良好甲苯不良二甲苯不良Q24：我如何知道玻璃底培养皿是无菌的？所有玻璃底培养皿均在 FDA 批准和认证的供应商处经过伽马射线照射。我们对餐具进行批量消毒，通常会同时对超过 2000 个单独的容器进行消毒。由于无菌是我们所有客户的绝对要求，因此我们使用过量的伽马剂量以确保无菌。弗洛维灭菌后，培养皿需接受质量控制分析以验证无菌性：将培养皿在不含抗生素和抗真菌的培养基中培养 7 天。此外，每个盒子上都有一个伽马辐照指示器，在受到伽马射线照射时会变成红色。 Q25：高耐受性 P35G-0.170-14-C 培养皿与标准 P35G-1.5-14-C 有何不同？ P35G-0.170-14-C 培养皿可用于哪些应用？P35G-0.170-14-C 培养皿采用高容差 1.5 号厚度盖玻片（盖玻片厚度 = 0.170 +/- 0.005 毫米），而标准 P35G-1.5-14-C 培养皿（盖玻片厚度 = 0.175 +/- 0.015 毫米）。

对于共焦、荧光、GSDIM、dSTORM、PALM 全内反射 (TIRF) 和其他高数值孔径物镜中使用的任何高数值孔径物镜，P35G-0.170-14-C 碟形天线将比 P35G-1.5-14-C 碟形天线提高图像质量（见下图）。例如，使用 P35G-0.170-14-C 培养皿的定量测量给出了 z 分辨率 of +/- 9.5%，而 P35G-1.5-14-C 培养皿中的 z 分辨率为 +/- 17.3% (n=5)。A B 

图：改进的 Z 轴分辨率 – 高容差玻璃盖玻片（在 P35G-0.170-14-C 玻璃底皿中）对亚分辨率珠子成像的影响，使用： A) P35G-0.170-14-C 和 B) P35G-1.5-14-C 玻璃底培养皿。将 5 µl FITC 标记的 175 nm PS-Speck 亚分辨率珠子添加到玻璃底培养皿的孔中并使其干燥。干燥后，添加 200 ul 水，并使用配备 Olympus UPLSAPO 60x (NA) 的 Zeiss LSM510 共焦显微镜对珠子进行成像=1.2) 水浸物镜。

图形和测量结果由芬兰于韦斯屈莱大学 Teemu Ihalainen 博士提供（2008 年）。

涂层

问题 26：用于涂覆 PDL 涂层玻璃底皿的聚 d-赖氨酸的分子量范围是多少？用于涂覆 P35GC-x-xx-C 和 P50GC-x-xx- 的聚 d-赖氨酸F 玻璃底菜在分子量范围为 70,000-150,000 道尔顿。问题 27：为什么培养皿涂有聚-d-赖氨酸（而不是聚-l-赖氨酸）？未经处理的玻璃和细胞都带负电荷。将聚赖氨酸涂在玻璃表面，使其带正电，从而增加玻璃表面和细胞之间的静电吸引力，从而改善细胞附着。聚-d-赖氨酸受到青睐，因为 d-对映体比天然存在的 l-对映体更不易被蛋白酶介导的分解。否则，聚-d-赖氨酸和聚-l-赖氨酸是等效的。问题28：胶原蛋白涂层玻璃底培养皿上涂有什么类型的胶原蛋白（部件号：P35GCol-x-xx-C或P50GCol-x-xx-F）？用于涂层P35GCol-x-xx-C或P50GColl-x-xx-F玻璃底培养皿的胶原蛋白是1型鼠尾胶原蛋白。问题29：涂聚赖氨酸还是胶原蛋白？会影响玻璃底皿的光学性能吗？镀膜为单层镀膜，不影响玻璃底皿的光学性能

特殊订单

Q30：除了标准的 10 毫米、14 毫米和 20 毫米直径玻璃表面外，玻璃底皿还有其他直径吗？玻璃表面直径为 7 毫米的玻璃底皿是标准产品（例如零件号 P35G-1.5-7-C 或 P35G-0-7-C）。此外，50毫米、60毫米和100毫米培养皿配有直径30毫米的玻璃表面（例如部件#P50G-1.5-30-F、P60G-1.50-30-F、P100G-1.5-30-F），并且是标准产品；这些培养皿最大限度地提高了细胞生长的表面积。当需要保存非常昂贵的试剂时，也可根据特殊订单提供直径为 5 毫米玻璃表面的培养皿（例如部件号：P35G-1.5-5-C）。 Q31：特殊订单所需的交货时间是多少？有特殊订单费用吗？特殊订单商品可以退货吗？交货时间：特殊订单商品通常可以在收到采购订单后 2-3 周内生产。然而，玻璃底培养皿的批量灭菌仅发生一次y 6 周。因此，灭菌、特殊订单产品的交货时间可能在 3-8 周之间。注意：如果客户使用紫外线和/或 70% 乙醇对培养皿进行消毒（例如，在组织培养罩中在紫外线下消毒 40 分钟，和/或如果使用 70% 乙醇浸泡 30 分钟，则可以缩短交货时间。特殊订单费用：对于 ≥ 3 箱的特殊订单，不收取特殊订单费用。但是，对于 < 3 箱的特殊订单，将按箱收取特殊订单费用。退货政策：特殊订单商品无法退货。Q32:与标准玻璃底培养皿相比，使用多孔玻璃底板有哪些优势？A：多孔玻璃底板的主要优点是您可以在相同条件下在同一培养板中培养 6、12、24、48 或 96 个培养物。多孔板非常适合高通量、高/高内涵筛选应用。B：使用多孔板进行分析是简化的，因为只需一 (1）板（相对于多个培养皿）需要处理。 C：对于许多应用，使用多孔板简化了培养物的处理（例如照射）。 D：玻璃底多孔板中的较小孔对于小体积的贵重试剂的应用非常有用。Q33：你们提供黑色的多孔玻璃底板吗？是的。为了最大限度地减少背向散射光和背景荧光，我们提供黑色 96 孔玻璃底板（部件号 PBK96G-1.5-5-F）。 PBK96G-1.5-5-F 板的所有属性均与标准透明壁 96 孔玻璃底板（部件号：P96G-1.5-5.F）相同，但 PBK96G-1.5-5-F 板中每个孔的侧壁是不透明的（黑色）。注意：背散射光和背景荧光在较大的 6 孔、12 孔、24 孔和 48 孔玻璃底板中不是问题。

MatTek 室式细胞培养幻灯片Q34：MatTek 室式细胞的孔尺寸是多少文化幻灯片？每孔应使用多少培养基？产品 孔尺寸 (cm)生长面积 (cm2)培养基体积/孔 (mL)CCS-22.17 x 2.094.551.2 – 2.5CCS-42.15 x 0.992.130.5 – 1.3CCS-81.00 x 0.980.980.2 – 0.6Q35: 我可以使用倒置吗使用显微镜观察 MatTek 室式细胞培养载玻片 (CCS) 中培养的细胞？是的，可以使用倒置显微镜观察 CCS 上生长的细胞。染色你的细胞并取下塑料上室。使用封固剂并将样品盖玻片到载玻片上。 MatTek 盖玻片，部件号：PCS-1.5-5024（1.5 号厚度 50 mm x 24 mm）专为 CCS 上培养的盖玻片样品而设计。Q36：作为 MatTek 室式细胞培养载玻片基础的显微镜载玻片的尺寸是多少？显微镜载玻片的尺寸为：长度：75.0 毫米，宽度：25.0 毫米，高度：1.0 毫米。 Q37：取下上室后，显微镜载玻片上是否会留下任何东西？有一个硅胶垫片在上室和显微镜载玻片下方。当腔室被移除时，垫圈通常会从载玻片上松开。但是，如果垫圈保留在显微镜载玻片上，则可以使用细尖镊子轻松将其从显微镜载玻片上剥离。 Q38：如果我需要超过 8 个孔，该怎么办？虽然我们不生产超过 8 孔的细胞培养载玻片，但 MatTek 玻璃底板可提供 12、24、48、96 和 384 孔的细胞培养载玻片。问题 39：移除上室后，显微镜载玻片上是否会留下任何东西？不会。CCS 没有涂层，但使用的高纯度钠钙玻璃将支持多种细胞类型的生长。对于更挑剔的电池，最终用户可以添加 ECM 涂层。无菌 ECM 涂层应新鲜使用，以实现最佳的细胞附着和生长。在无菌条件下应用 ECM 涂层后，在接种之前，用磷酸盐缓冲盐水冲洗 2 次，并用用于细胞生长的培养基冲洗 1 次。细胞。不要让 ECM 涂层变干。PermaCell 细胞培养插入物Q40：PermaCell 插入物和 96 孔插入板通常用于什么？

PermaCell 插入物和 96 孔插入板设计用于 3 维器官型组织培养。将细胞接种到微孔膜顶端侧的插入物中。然后可以将培养物浸入水中（将培养基添加到膜的基底侧和顶端侧或气液界面 (ALI) 处，其中培养基仅添加到基底室（即培养物的顶端侧暴露在培养箱中的大气中）。对于许多细胞类型，在 ALI 处培养可改善细胞分化并诱导体内类似 3 维组织特性的形成。问题 41：使用带有悬挂顶部的插入物的优势是什么板？悬挂式顶板允许您在基底室中使用更多的培养基，从而减少培养基交换的频率。插入物可以悬挂在 12 瓦的孔板（部件号：CCI12-HANGTOP）或 24 孔板（部件号：CCI24-HANGTOP）。如果使用 CCI12-HANGTOP 板，请在每个孔中填充 5.0 mL 介质。如果使用 CCI24-HANGTOP 板，请在每个孔中填充 2.5 mL 介质。对于 96 孔插入板，每孔使用 0.3 mL（不需要悬挂顶板）。问题 42：我应该使用哪种 PermaCell 插入件？

PermaCell 插入件可提供不同的膜材料选项：

a) 聚四氟乙烯（PTFE，部件号 CCI24-PTFE-0.4） b) 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET，部件号 CCI24-PET-0.4） c) 聚碳酸酯（PC，部件号 CCI） 24-PC-0.4)。

所有膜选项均具有高孔密度（孔径 0.4 µm，1 x 108 孔/cm2）。不同的细胞类型在这些膜上的表现可能不同。如果您不确定要使用哪种类型的插入件，可以使用包含 4 个插入件（PTFE、PET 和 PC 插入件各 4 个）的试用装（部件编号：CCI24-试用版）。注：PTFE 嵌件相对于 PET 和 PC 嵌件的一项潜在优势是PTFE 膜在湿润时是微观透明的。因此，可以使用倒置显微镜观察在 PTFE 膜上生长的细胞。对于更高通量的测试，请使用 PermaCell 96 孔插入板（部件号 CCI96-PET-0.4 或 CCI96-PET-CL-0.4）。 Q43：PermaCell 插入物是否需要涂有细胞外基质 (ECM)？ PermaCell 插入物经过组织培养处理，无需 ECM 涂层即可支持多种细胞类型的生长和分化。然而，根据您感兴趣的细胞类型和终点/组织特性，ECM 涂层可能是有益的。对于大多数应用，建议涂层体积为 150-250 µL/cm2。问题44：如何监测 PermaCell 插入物中汇合细胞/组织层的形成？监测插入物上汇合细胞层或组织形成的一种非破坏性便捷方法是测量跨上皮电阻 (TEER)。我们推荐 World Precision I 的 EndOhm-12 腔室与 CCI24 PermaCell 插入件配合使用的仪器。对于 PermaCell 96 孔插入板，我们提供专门设计的 TEER 探针（部件号：CCI96-TEER）。问题45：PermaCell 插入物和插入板是否适合渗透性或趋化性实验？形成汇合的细胞/组织层后，所有 PermaCell 插入物和插入板都适合进行渗透性实验。供体溶液可以直接添加到顶端组织表面，并且可以随时间监测对基础溶液的渗透。对于观察细胞通过组织进入基底室的趋化性实验，应订购带有 8μm 孔聚碳酸酯膜（部件号 CCI24-PC-8）的插入物。该膜将允许细胞通过组织和下面的膜迁移到基底室中。Q46：PermaCell 插入物或插入板是否透明？如何观察膜上生长的细胞形态？聚四氟乙烯（PTFE，部件号 CCI24-PTFE-0.4）插入件和透明聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET，部件号 CCI24-PET-CL-0.4）插入板在水介质中是透明的。可以使用具有 10 倍或 20 倍物镜的倒置显微镜直接观察在插入物上培养的细胞。关于 MatTek Q47：MatTek 经营多久了？ MatTek 公司于 1985 年由两位麻省理工学院化学工程教授创立。 1991年，该公司利用其核心聚合物表面改性技术进入新兴的组织工程市场。 1993 年，MatTek 第一个体外人体组织等效物 EpiDerm 推出，并从 1993 年至今一直持续生产。 Q48：MatTek 的主要产品线有哪些？

MatTek 生产各种正常（非转化）、人体细胞衍生的、3 维、器官型体外组织等效物。该网站 MatTek.com 致力于提供有关体外人体组织等效物的详细信息。它们有丝分裂并相遇具有非代谢活性，在结构和生化方面都非常模仿体内的对应物，并且具有保证的重现性。

MatTek 还生产一系列玻璃底培养皿。这些培养皿用于共焦、偏振光和荧光显微镜技术，是活细胞显微镜应用的理想选择。3D 组织模型Q49：MatTek 生产多少种不同类型的实验室培养的人体组织模型？MatTek 生产 12 种实验室培养的人体组织模型，所有这些模型均源自人类上皮细胞（单击组织名称了解详细信息）：

EpiDerm 是我们的人类表皮组织等效物，由正常的人类细胞衍生的表皮角质形成细胞组成，已被培养形成多层、高度分化的人类表皮模型。 EpiDerm，通常也称为重建人类表皮 (RhE)，已连续生产超过 15 年。还有一个\"未开发”版本，EpiDerm-201EpiDermFT（EpiDerm Full Thickness），一种真皮/表皮人体皮肤等效物，具有轮廓分明、功能齐全的基底膜。MelanoDerm是由角质形成细胞和黑色素细胞组成的人体皮肤等效物，经过培养形成多层、高度分化的人体表皮模型。黑色素瘤是由人类恶性黑色素瘤细胞、正常、人源性表皮角质形成细胞和正常人组成的全层黑色素瘤皮肤模型，人源真皮成纤维细胞，经过培养，与 CM 恶性肿瘤各个阶段的黑色素瘤细胞形成多层、高度分化的表皮。EpiOular 由正常人源表皮角质形成细胞组成，在无血清培养基中培养，形成复层鳞状上皮，类似于体内人角膜上皮EpiCorneal 由培养形成分层鳞状上皮的正常人角膜上皮细胞组成与正常人角膜非常相似的皮细胞EpiAirway 由正常的、人类细胞来源的气管/支气管上皮细胞组成，这些细胞经过培养形成伪分层、高度分化的模型，与呼吸道上皮组织非常相似。EpiAlveolar 由原代人肺泡上皮细胞、肺内皮细胞和成纤维细胞产生。EpiOral，我们的人类颊（内颊）等效物，EpiGingival，我们的人类牙龈（牙龈）组织EpiVaginal，源自人宫颈阴道部 (ECV) 上皮细胞。EpiIntestinal，将肠上皮细胞、潘氏细胞、M 细胞、簇细胞和肠干细胞整合成高度分化的极化上皮。Q50：这些组织的典型配置是什么？典型配置包括：

直径 9 毫米的单个组织，每个组织在单孔组织培养板插入物中产生（以 12 或 24 个带培养基的组织套件装运） ）22毫米直径的单个组织，每个组织在一个单一的过程中产生le 孔组织培养板插入件（与培养基一起装在 6 个组织套件中）

组织还提供 24 孔和 96 孔高通量板。特殊配置还适用于特定组织类型（例如，在\"snapwell”培养插入物中生产的 EpiAirway 组织，用于使用扩散室）。Q51：MatTek 是否生产任何其他体外产品？是的，MatTek 还生产人类树突状（朗格汉斯）细胞。 MatTek 开发了一种从脐带血中采集的 CD34+ 祖细胞（造血干细胞）生成人类树突状细胞的新方法。应用包括过敏性、抗原结合和呈递、病毒感染、免疫治疗和转染研究。Q52：任何体外人体组织等同物也含有树突状/朗格汉斯细胞吗？是的。 EpiVaginal with Langerhans Cells（\"VLC”产品）是已发布的产品。其他几种包含 Dendrit 的 MatTek 体外人体组织等效物ic 细胞处于\"beta”阶段。请联系MatTek 了解更多详细信息。Q53：MatTek 的体外人体组织等效物有哪些典型应用？

每种模型都有多种应用。例如，我们的 EpiDerm 体外皮肤等效物用于确定和/或研究以下内容：皮肤腐蚀、皮肤刺激（皮肤毒性）、皮肤光毒性、经皮吸收（药物渗透性、透皮药物递送）、炎症、基因分析、抗氧化剂、代谢、细胞凋亡、抗菌肽和血管生成。

确定 MatTek 体外产品是否已用于与您的应用类似的应用中的一个非常有用的方法是搜索我们的技术参考列表。

制药我们的体外人体组织等效物的生态学/毒理学临床前应用包括经皮、经颊、经粘膜药物输送；生物相容性、毒性研究；艾滋病毒、杀菌剂研究；乙等价性研究；先导化合物优化等。

MatTek 体外人体组织等效物的制药/毒性应用示例如下：在通过基于生化（酶）的初级筛选和基于细胞的二次筛选处理新药物库后，但在进行临床前动物研究之前，剩余的候选药物经过基于体外人体组织的第三次筛选，以确定最佳渗透性和/或最小毒性特性。通过第三次筛选的候选药物随后将进入基于动物的研究，但该研究现在需要的动物更少，因此可以构建为小型验证性研究，以满足 FDA（或其他监管机构）的要求。此外，通过在人类临床研究开始之前进行基于人体组织的三级研究，基于动物研究结果的跨物种外推错误的可能性也已被消除。显着减少。

在购买我们的体外人体组织等效物之前，您可以从我们的每个人体组织等效物中购买纯化的总 RNA（对照和处理过的）和/或蛋白裂解物（对照），以确认特定基因的表达水平或特定蛋白质的存在/不存在。Q54：这些体外人体组织等效物的价格是多少？MatTek 的体外人体组织等效物的价格非常合理，特别是考虑到用于生产这些组织的昂贵材料，以及培养特定组织所需的时间（2-3 周）和劳动力（每批技术人员\"接触”的次数）。这些组织的成本远低于最终用户尝试从最初收获的种子细胞中重复生产这些组织等效物的成本。 MatTek 可根据要求提供印刷版价目表 — 要接收价目表，只需填写我们的在线信息申请表。问题 55：任何体外组织都可以用于人体吗？不可以，MatTek 的体外人体组织等效物均未获批准用于人体。 Q56：你们的体外产品有经销商或分销商吗？除一处例外（日本）外，MatTek 的体外产品没有经销商或分销商。产品的性质决定了最终用户最好直接与 MatTek 打交道。 Q57：我从未使用过你们的体外人体组织等效物 - MatTek 是否提供免费样品进行测试？通常，由于生产过程的性质，MatTek 不会提供我们的体外人体组织等效物的免费样品。 MatTek 将向合格的潜在客户提供概念验证。请联系 MatTek 了解详情。问题 58：体外人体组织等效物如何运输？组织通常在 4°C 下在添加培养基的琼脂糖凝胶上运输。发货日期：每周一。发货交付：周二上午通过联邦快递优先服务（美国）。美国境外：周二至周四，具体取决于地点。Q59：你们运送体外组织吗在美国以外？是否有任何特殊规定或需要填写的文件？是的，MatTek 拥有许多国际客户，尤其是欧盟客户。每个国家/地区都有一套独特的运输要求。请联系 MatTek 了解有关特定国家/地区运输要求的更多信息。 Q60：我们有需要测试的产品，但没有执行这些测试的现场专业知识？ MatTek 会为我们执行测试吗？MatTek 可以为您的组织进行概念验证 - 请联系 MatTek 了解详细信息。一旦我们就您的预期应用进行了对话，我们还可以向您发送 MatTek 批准的合同测试实验室列表，这些实验室可以使用 MatTek 体外人体组织等效物进行检测。问题 61：是否有我可以遵循的详细协议来使用 MatTek 体外人体组织等效物？是的，MatTek 为我们每个体外人体组织等效物的所有主要应用都有详细的协议。请联系t MatTek 与您的具体应用，我们将提供适当的方案供您审查。Q62：以下每个术语适用于 MatTek 的体外人体组织等效物时有何意义？正常细胞：非转化细胞。 MatTek 不使用永生化细胞系。根据定义，永生化细胞系已被转化，因此具有真正的体外人体组织等效物所不希望的特征。人类细胞衍生：所有 MatTek 组织等效物均源自人类细胞。该程序消除了使用非人类细胞完成的所有工作所伴随的跨物种外推问题。器官型：MatTek 的生产工艺可生产差异化、多层、3D 人体组织等效物，与体内发现的组织非常相似。 MatTek 在组织工程方面的进步使得使用体外人体组织等效物来探索许多只能追求的科学问题成为可能Q63：MatTek 体外人体组织等效物最重要的一个特征是什么？再现性。对于成功使用体外人体组织等效物而言，没有其他特征比再现性更重要。为什么？如果没有经过可重复的验证，组织就无法在设计为长时间运行的应用程序中使用该技术。例如，如果您的组织计划使用体外人体组织等效物建立有关其产品配方的皮肤刺激信息数据库，则只有基于使用高度可重复的体外人体组织等效物的检测数据，该数据库才能在多年内保持有用。

出于这个原因，MatTek 花费了多年的时间来开发可用的最具重复性的体外人体组织等效物。例如，MatTek 拥有超过 15 年的 EpiDerm 人类皮肤等效物的再现性数据。

再现性对于成功非常重要。ul 使用体外人体组织等效物，表明 MatTek 保证其所有体外组织的可重复性。Q64：获取有关我的体外应用的具体信息的最佳方式是什么？填写 MatTek 信息申请表，包括您的详细应用信息。我们将审查您的应用信息，并为该应用推荐适当的体外人体组织等效物和方案。您对如何在工作中使用我们的产品的描述越详细，我们就越能具体地答复您的询问。Q65：您网站上引用的所有这些 TR 是什么？\"TR”表示 MatTek 技术参考。技术参考文献是 MatTek 和/或使用 MatTek 体外产品的组织的科学人员在主要技术会议和会议上展示的技术海报/论文。

MatTek Web 上有一个可搜索的 TR 引文/摘要数据库地点。数据库中列出了 700 多个 TR（并且还在不断增加！）。单击此处转至 MatTek TR 页面。问题 66：查看 MatTek 是否具有与特定应用程序、关键字、个人或组织相关的信息的最快方法是什么？如上所述，MatTek 网站上有一个可搜索的技术参考 (TR) 引文/摘要数据库。数据库中列出了 700 多个 TR。单击此链接转至 MatTek TR 页面。问题 67：什么是 ICCVAM 和 ECVAM，为什么我在 MatTek 网站上看到它们被引用？ICCVAM（美国）和 ECVAM（欧洲）是最直接负责引入和验证非动物替代毒理学测试方法以消除/减少这些研究中使用的动物数量的组织。

摘自 ICCVAM 网站：\"机构间协调委员会关于替代方法验证 (ICCVAM) 于 1997 年由国家研究所所长建立环境健康科学 (NIEHS) 执行公法 (P.L.) 103-43 中的 NIEHS 指令。该法律指示 NIEHS 开发和验证新的测试方法，并建立毒理学测试方法的验证和监管接受的标准和流程。 P.L. 2000 年 ICCVAM 授权法案第 106-545 号规定将 ICCVAM 设立为常设委员会。该委员会由来自15个联邦监管和研究机构的代表组成；这些机构出于风险评估目的生成、使用或提供毒性测试方法的信息。该委员会负责协调与毒理学测试方法的开发、验证、接受和国家/国际协调有关的跨机构问题。”

摘自 ECVAM 网站：\"ECVAM（欧洲替代方法验证中心）是根据 1991 年 10 月委员会向理事会和议会的来函创建的，其中指出了 D 中的一项要求。关于保护用于实验和其他科学目的的动物的指令 86/609/EEC，该指令要求委员会和成员国应积极支持可减少、改进或替代实验动物使用的方法的开发、验证和接受。 ECVAM 成立于 1992 年，是环境研究所的一个单位，是联合研究中心的一部分，并于 1998 年转移到新成立的位于意大利伊斯普拉的健康和消费者保护研究所。” Q68：什么是\"经过验证的”体外方法？ MatTek 体外人体组织等效物是否有经过验证的方法？摘自：验证的原则和程序，第 2 章（ATLA 30，补充件 1，13.19，2002）：\"替代方法的验证是为特定目的建立方法的相关性和可靠性的过程。在替代测试方法的背景下，相关性是指测试方法的科学依据。测试系统以及相关预测模型 (PM) 的预测能力，而可靠性是指实验室内部和实验室之间以及一段时间内测试结果的可重复性。”

替代方法的整个验证过程可能需要 8-10 年。该过程的科学部分（正式的预验证和验证研究）通常需要 4-6 年。

MatTek 有两种经过正式验证的替代方法 - 用于皮肤刺激测试和真皮腐蚀测试的 EpiDerm。其他几个人已经完成了该过程的主要部分 - 由高露洁棕榄赞助的用于眼部刺激的 EpiOcular（Draize 兔眼测试的替代方案）和用于经皮吸收测试的 EpiDerm。 Q69：什么是 MTT 测定以及它的用途是什么？MTT 测定是一种非常准确的终点（方法），用于测量体外人体组织等效物的细胞活力。该测定是一种比色测定测量活细胞线粒体将四唑成分 (MTT) 还原成不溶性甲臜产物的情况。将细胞与 MTT 试剂孵育数小时后，添加溶液以裂解细胞并溶解有色晶体。使用 ELISA 酶标仪在 570 nm 波长下读取样品。产生的颜色量与活细胞的数量成正比。 Q70：任何 MatTek 体外人体组织等效物都可以用于透皮给药研究吗？可以，MatTek 的 EpiDerm 体外人体组织等效物已在多项此类研究中成功使用。单击以下链接可查看与此主题相关的信息： 透皮给药 Q71：任何 MatTek 体外人体组织等效物都可以用于吸入/鼻腔给药研究吗？可以，MatTek 的 EpiAirway 气管/支气管体外人体组织等效物已成功用于多种鼻内和吸入给药研究研究。点击以下链接查看与药物输送相关的信息。

芯片器官培养平台Q72：使用idenTx芯片/板需要购买额外的设备吗？不需要额外的设备。 AIM 芯片和板是类似于标准组织培养塑料器皿的独立消耗品。如果您目前在实验室中进行细胞培养实验，您只需购买您选择的可聚合水凝胶即可将您的研究扩展到 3D。 Q73：我可以使用 idenTx 芯片/板进行哪些实验？迄今为止，我们的客户使用 AIM Biotech 设备发表了 80 多篇出版物。 AIM Biotech 的科学创始人及其合作者还使用该技术的非商业版本发表了 60 多篇出版物。 AIM Biotech 客户使用商业芯片发表的出版物已被 Nature Medicine、Cell、Cancer Cell 等著名期刊接受。完整的出版物列表可在此处查看。他们的种马涵盖免疫肿瘤学（免疫检查点和 T 细胞治疗）、血脑屏障、血管生成、跨内皮迁移、癌症聚集体分散、癌细胞迁移、外渗、内渗、神经突引导、干细胞分化等。AIM Biotech idenTx 芯片/板是开放平台，供您测试新想法和开发有趣的应用。 idenTx 系列芯片和板具有 1 个凝胶通道，两侧有 2 个介质通道。在不久的将来，AIM 将发布具有不同通道配置的芯片，从而实现新的实验设计。 Q74：idenTx 芯片/板中可以使用哪些水凝胶？可以使用任何适合您的应用的可聚合水凝胶，例如各种类型的胶原蛋白、纤维蛋白等。水凝胶可以单独使用，也可以与层粘连蛋白、基质胶等其他成分结合使用。但是，请注意，水凝胶的质量可能因制造商而异。也可能存在批次间的差异Q75：identTx 芯片需要多少个单元？最佳细胞密度取决于您的具体应用和实验设计。例如，idenTx 3 芯片（每个芯片有 3 个微流体位点）每个位点需要大约 30,000 个内皮细胞才能在一夜之间生成汇合的内皮单层。相比之下，如果您计划将细胞接种到水凝胶中来研究细胞迁移，则每个位点只需要 3000 个细胞。 AIM芯片是灵活的平台，可以适应各种细胞接种密度；您可能需要针对您的特定应用优化细胞接种策略。请访问本网站的\"应用程序特定协议”部分，了解有关特定应用程序的更多信息。Q76：我应该多久更换一次介质？与标准 2D 细胞培养瓶不同，微流体装置使用非常少量的培养基。因此，您应该每天更换介质以补充消耗的介质。我们建议用户注意更换注射泵以保持稳定的梯度或间隙流量。Q77：我可以将哪些设备连接到芯片？ AIM芯片可以通过AIM鲁尔连接器（LUC-1）连接到具有鲁尔接口的设备。连接器直接连接到介质通道端口，形成母鲁尔锁接口，使用户能够连接公鲁尔组件，例如： • 注射器筒 – 形成介质储存器，或为凝胶通道上的间隙流建立压力梯度 • 通过管道和第 3 方公鲁尔管连接器的注射泵 – 运行动态细胞培养实验，实现介质交换或设置跨凝胶通道的间隙流或化学梯度 请使用随附的入口密封件来密封凝胶入口。这将阻止细胞培养基流过多孔凝胶并通过凝胶入口流出。问题78：我可以使用哪些显微镜技术来分析 idenTx 芯片/板？ AIM Biotech idenTx 芯片/板可在明亮的光纤下查看场、相差、落射荧光、2 光子和共焦显微镜。该芯片还与用于高放大倍率成像的油/水浸技术兼容。但是，请注意，当使用高数值孔径 (NA) 透镜对芯片较深区域进行成像时，由于散射和球面像差，信号可能会变弱。 Q79：除了显微镜之外，我还可以对 idenTx 芯片/板使用哪些分析技术？您可以将来自多个站点的介质汇集到介质通道中，并通过酶联免疫吸附测定 (ELISA) 或其他测定来检测介质中存在的分析物（通常是感兴趣的蛋白质）。但是，请注意，通道中物质的局部浓度通常高于从端口收集的介质中的浓度。培养基通道中的细胞也可以通过胰蛋白酶消化来收集。水凝胶也可以用适当的酶溶解（例如，胰蛋白酶用于纤维蛋白凝胶，胶原酶用于胶原蛋白 g）els）从凝胶内释放细胞。您可以执行聚合酶链式反应 (PCR) 或利用收集的细胞作为输入的其他检测。请考虑您的实验设置中可以从每个通道收集的细胞数量。您可能需要针对需要更多细胞的检测调整收集策略。问题80：我可以重复使用 idenTx 芯片/板吗？不可以，AIM Biotech idenTx 芯片/板不能重复使用。如果再次使用芯片，则无法保证芯片的无菌性和功能性。 Q81：我可以在没有微量滴定板支架的情况下使用 idenTx 3 芯片吗？是的你可以。然而，您必须确保芯片升高，以便气体交换可以通过层压的底面进行。微量滴定板支架的设计可确保层压底面的空气流通不受阻碍。该支架还有助于减少芯片介质的蒸发损失。